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第一章 病理常规制片技术1

第一节 苏木素-伊红（HE）制片技术1

一、固定、取材1

二、脱水、透明6

三、渗蜡、包埋10

四、切片、裱片12

五、染色14

六、HE染色、封片15

七、HE制片的质量控制22

八、细胞学涂片制片技术24

九、眼部肿物临床快速控制切除法26

十、组织脱钙29

十一、HE教学片褪色重染方法30

十二、附录31

第二节 冷冻切片技术34

一、基本概念34

二、仪器设备的配置34

三、试剂配制35

四、冷冻切片操作36

五、染色结果观察37

六、质量控制37

七、注意事项38

八、冷冻切片技术的优点和局限性39

九、冷冻切片技术的应用39

第三节 人眼球的固定与制片技术39

一、固定40

二、取材40

三、脱水43

四、包埋、切片44

五、染色、封片45

六、结果46

第四节 几种动物眼球的固定与制片技术47

一、兔子眼球标本的制作48

二、大白鼠眼球标本的制作50

三、小白鼠眼球标本的制作52

第五节 火棉胶制片技术55

一、概述55

二、方法55

三、火棉胶制片的优缺点58

四、注意事项59

第二章 特殊染色与组织化学染色61

第一节 概述61

一、特殊染色和组织化学的概念与机制61

二、应用范围62

三、试剂配制62

四、实验对照62

第二节 网状纤维染色62

一、概述62

二、染色方法63

三、染色原理64

四、注意事项64

五、应用65

第三节 胶原纤维染色65

一、概述65

二、染色方法66

三、染色原理68

四、注意事项68

五、应用68

第四节 弹力纤维染色69

一、概述69

二、染色方法69

三、染色原理71

四、注意事项71

五、应用71

第五节 肌纤维染色71

一、概述71

二、染色方法72

三、染色原理73

四、注意事项73

五、应用73

第六节 纤维素染色74

一、概述74

二、染色方法74

三、染色原理76

四、注意事项76

五、应用77

第七节 细菌染色77

一、概述77

二、染色方法77

三、染色原理79

四、注意事项79

五、应用79

第八节 抗酸菌染色80

一、概述80

二、染色方法80

三、染色原理82

四、注意事项82

五、应用82

第九节 霉菌染色83

一、概述83

二、染色方法83

三、染色原理85

四、注意事项85

五、应用85

第十节 脂类染色86

一、概述86

二、染色方法86

三、染色原理87

四、注意事项88

五、应用89

第十一节 淀粉样变染色89

一、概述89

二、性质89

三、染色方法90

四、染色原理92

五、分类92

六、注意事项92

七、应用92

第十二节 糖类染色93

一、概述93

二、染色方法94

三、染色原理95

四、注意事项95

五、应用96

第十三节 黏液物质染色96

一、概述96

二、染色方法97

三、染色原理99

四、注意事项100

五、应用100

第十四节 黑色素染色100

一、概述100

二、染色方法101

三、染色原理102

四、注意事项102

五、应用103

第十五节 含铁血黄素染色103

一、概述103

二、染色方法104

三、染色原理105

四、注意事项105

五、应用105

第十六节 钙盐染色106

一、概述106

二、染色方法106

三、染色原理107

四、注意事项107

五、应用107

第十七节 核酸染色108

一、概述108

二、染色方法108

三、染色原理110

四、注意事项110

五、应用111

第十八节 酶组织化学染色111

一、概述111

二、染色方法111

三、染色原理114

四、注意事项114

五、应用115

第十九节 玻璃器皿的洗涤115

一、新玻璃器皿的洗涤115

二、使用后玻璃器皿的洗涤115

三、重铬酸钾-硫酸清洁液的配制116

第三章 免疫组织化学技术118

第一节 免疫组织化学概论118

一、抗原118

二、抗体119

三、常用免疫组织化学技术及其机制119

四、免疫组织化学技术的特点与局限119

第二节 免疫组织化学的基本技术方法120

一、抗体的制备与使用120

二、组织材料的处理122

三、免疫染色122

四、对照的设定124

五、免疫组织化学染色结果的判断125

第三节 免疫酶组织化学技术126

一、标记抗体所用的酶及其性质126

二、标记常用的酶126

三、提高免疫酶组织化学技术敏感性的方法126

四、提高免疫酶组织化学方法敏感性的技术手段128

五、免疫酶组织化学染色干扰因素的消除129

六、免疫组织化学检测试剂盒的合理选用130

第四节 免疫荧光技术130

一、免疫荧光染色的原理131

二、免疫荧光技术染色操作准备132

第四章 分子生物学技术134

第一节 原位杂交技术134

一、原位杂交的基本原理134

二、原位杂交的探针134

三、原位杂交技术的操作136

四、荧光原位杂交技术138

第二节 PCR技术141

一、PCR的概念及基本原理141

二、PCR的基本反应步骤141

三、PCR反应的各种组分142

四、PCR反应条件的控制143

五、PCR技术的基本步骤144

六、PCR的主要类型145

七、PCR操作中的污染及对策147

八、PCR在病理诊断中的应用149

第五章 人眼部组织细胞培养技术152

第一节 细胞体外培养的环境与准备工作152

一、培养实验室的设计和守则152

二、体外细胞培养的设备与器械154

三、培养用品的洗涤与消毒灭菌156

四、组织细胞培养的污染及排除160

五、培养基及常用的消化液和抗生素161

第二节 正常人眼组织细胞的体外培养163

一、角膜上皮细胞的体外培养164

二、角膜内皮细胞的体外培养168

三、小梁细胞的体外培养171

四、虹膜色素上皮细胞的体外培养177

五、晶状体囊膜上皮细胞的体外培养180

六、人睫状突无色素上皮细胞培养184

七、人视网膜胶质细胞的体外培养187

八、人视网膜血管内皮细胞的体外培养191

九、视网膜色素上皮细胞的体外培养196

十、结膜上皮细胞的体外培养202

十一、人泪腺上皮细胞的体外培养205

十二、Tenon囊成纤维细胞的体外培养210

十三、视网膜M u ller细胞的体外培养213

十四、视神经星形胶质细胞的体外培养217

第三节 人眼内常见恶性肿瘤细胞的体外培养220

一、视网膜母细胞瘤细胞的体外培养220

二、人葡萄膜黑色素瘤细胞的体外培养228

第四节 Rb细胞克隆及人脐静脉内皮细胞培养235

一、Rb细胞克隆235

二、人脐静脉内皮细胞的培养239

第五节 细胞的冻存与复苏244

第六节 细胞培养的小常识246